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Soutenance de thèse de Danica Ciric intitulée:

"Biochemical and structural study of Shadoo protein and its interaction with PrP"

La soutenance se déroulera le vendredi 5 décembre à 14h30 au 2ème étage du bâtiment 156.

Ce travail a été réalisé sous la direction de Human Rezaei dans l'équipe Macro-Assemblages Protéiques et Maladies à Prion (MAP²) au sein de l'unité Virologie et Immunologie Moléculaires.

La thèse sera soutenue devant le jury composé de :

Résumé

Les maladies à prion sont caractérisées par un changement conformationnel de la protéine prion cellulaire (PrP^C) en une forme anormale enrichie en feuillet β (PrP^Sc). La protéine Shadoo (Sho) appartient à la famille des protéines prion. Elle est particulièrement exprimée dans le système nerveux central et est hautement conservée chez les vertébrés. Les protéines Sho et PrP partagent de nombreuses similitudes, allant de leur co-localisation anatomo-histologique à une forte similarité de séquence. Ces observations suggèrent que Sho et PrP pourraient partager également un lien fonctionnel. D’autre part, l’inhibition de l’expression de Sho durant l’infection à prion, ainsi que l’interaction entre ses deux protéines observée par double hydride, laissent suggérer une relation étroite entre ses deux protéines pendant la phase de réplication du prion. L’objectif de ce travail de thèse est d’explorer le rôle de la protéine Sho dans la dynamique conformationnelle de PrP, ainsi que l’effet d’une telle interaction sur le phénomène de réplication. La caractérisation de la structure secondaire de Sho mesurée par dichroïsme circulaire montre que Sho est une protéine naturellement désordonnée entre les pH 3.5 et 8. Le spectre RMN de Sho correspond au spectre typique des protéines non repliées, même-si Sho semble adopter une structure organisée localement au niveau du segment C-terminal. D’autre part, l’utilisation de technique de biochimies et de biophysiques nous ont permis de démontrer que Sho et PrP formaient un complexe 1 :1 avec un Kd de l’ordre du micromolaire. Cette interaction a pour conséquence une altération du repliement de PrP. L’utilisation de la forme tronquée de PrP, mimant le fragment C1, nous a permis d’observer une liaison allostérique avec un nombre de hill de 4, ce qui suggère une tétramérisation. D’autre part, la co-polymérisation semble avoir pour conséquence une augmentation du pouvoir infectieux des particules prion en culture de cellules. Pour conclure, l’ensemble de nos résultats montre que la protéine Sho affecte la réplication du prion, soit en agissant comme une holdase, soit en interférant avec le rôle protecteur du fragment C1.